為什么ELISA試劑盒直接法測定抗體要加酶標抗抗體?

更新時間：2021-07-16

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　　在ELISA試劑盒實驗中，用直接法測定抗體，不能直接用酶符號測定抗體，然后直接加入底物。而要加酶標抗抗體呢?

　　如果將酶符號應用于待測抗體，直接法比經(jīng)典法更復雜，在探索符號條件時，不能保證抗體因誤操作而失活;酶標二抗目前已較為常見，被規(guī)模化生產(chǎn)，購買后使用方便。如果你直接做好了，方法已經(jīng)優(yōu)化了，第一抗二抗顯色，總時間加起來，結(jié)果不會超過2到3小時。

　　可以使用直接ELISA法，即抗體包板用來在抗原上標記酶，然后顯色，這與直接方法相比，減少了一步的時間，縮短了時間。然而，直接法和直接法各有優(yōu)缺點，其要求取決于實驗的具體要求。

　　1、要檢測的抗體通常是免疫后產(chǎn)生的抗體。其中有免疫功能衰竭、抗體過少等因素存在。酶符號的使用存在許多不確定因素，如在使用酶符號之前無法測量效價的可能性，這會導致不必要的混淆。

　　2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中酶聯(lián)抗體與抗體結(jié)合后，ELISA試劑盒具有很強的信號放大作用，可使信號擴增一千倍以上，適用于低抗體含量的測定。

　　3、直接酶標記抗體在篩選出單克隆抗體后可以考慮，但測定系統(tǒng)的建立需要大量的工作。

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